После заключения Люблинской унии традиционные политические связи с доминировавшей в жизни Великого княжества Литовского литовской знатью оказались ослаблены и разорваны, а экспансия польской знати на южнорусские земли Великого княжества Литовского ещё не началась. В этих условиях южнорусская знать во главе с Константином Константиновичем Острожским могла выступать как самостоятельная политическая сила. В середине 1570 гг. киевский воевода успешно завершил длительные хлопоты, связанные с возвращением себе той части отцовского имущества, которой раньше владела Беата Острожская, в том числе Острога. К концу XVI в. Острожские стали одним из наиболее значительных магнатских родов в Речи Посполитой. В соответствии с этим новым пониманием роли Константина Константиновича Острожского в 1578–1581 гг. была создана генеалогическая легенда о происхождении Острожских от Галицко-Волынского князя Даниила Романовича. Во второй половине 1570 гг. Константин Константинович Острожский принимал активное участие в обеспечении безопасности юго-восточных границ Речи Посполитой от набегов крымских татар (1575, 1577, 1578 гг.). В 1579 г., во время очередной фазы войны Речи Посполитой с Россией, участвовал в нападении на Черниговскую землю. 1570–1580 годы были временем активной борьбы Константина Константиновича Острожского за утверждение позиций православной церкви. Наиболее значительные инициативы были связаны с Острогом, который стал главной резиденцией магната. Около 1576 г. Константин Константинович Острожский основал в Остроге православную школу – первое высшее православное учебное заведение в Речи Посполитой (см. Острожская академия), в 1585 г. князь дал фундуш на содержание академии – замок и город Сураж и ряд сёл. Среди преподавателей в Острожской школе преобладали православные русины: Герасим Данилович Смотрицкий, как полагают исследователи, первый ректор, Василий Суражский (Малюшицкий Василий Андреевич), Юрий Рогатинец, священник Дамиан Наливайко, были также греки: Кирилл Лукарис (см. Кирилл I Лукарис), Эммануил Ахиллеос (выпускник римской коллегии имени св. Афанасия), Евстафий Нафанаил с Крита, который был также учителем младшего сына Константина Константиновича Острожского Александра. Магнат принимал в академию преподавателей-католиков, например, бывшего профессора Ягеллонского университета Яна Лятоша, критика григорианского календаря; Константин Константинович Острожский безрезультатно ходатайствовал перед папой Римским Григорием XIII о присылке в Острог учителей. Исследователи полагают, что в академии преподавали протестанты (кальвинист Андрей Рымша), хотя это не подтверждено. Основание академии в Остроге имело большое значение для существования православной церкви в Речи Посполитой; среди выпускников Острожской школы – архиепископ Мелетий (Смотрицкий), гетман Пётр Кононович Сагайдачный, преподобный Иов (Княгинецкий). Константин Константинович Острожский развивал церковную школьную систему и вне Острога, способствовал возникновению или возрождению школ в Киеве, Владимире-Волынском и Турове. Несмотря на заботу о воспитании православного юношества, Константин Константинович Острожский не смог предотвратить переход в католицизм своих сыновей Януша и Константина, и только самый младший (Александр) до кончины в 1603 г. оставался православным.