Главной святыней Колоцкого монастыря была чудотворная Колочская икона Божьей Матери. На Соборе 1547 г., созванном при Московском митрополите Макарии, было утверждено празднование в честь иконы 9 июля. В 1830 г., во время свирепствовавшей холеры, в монастыре был устроен карантин и заступлением Божьей Матери спасены от болезни не только все пребывавшие в обители и в карантине, но и окрестные жители. В 1848 г., во время эпидемии холеры, списки Колочской иконы носили крестным ходом по ближним деревням. Приносили образ и в Андреевский приход, после чего в храме села Андреевского оставили его список, а в 1874 г., при возведении сохранившейся каменной церкви во имя мученика Андрея Стратилата, устроили в ней придел в честь Колочской иконы Божьей Матери. В сентябре 1871 г., когда в Можайске появились первые больные холерой, жители испросили благословение у священноначалия принести чудотворную Колочскую икону, для встречи которой прибыл Можайский  епископ Игнатий (Рождественский). Икону по просьбе монахов Лужецкого монастыря приносили и в эту обитель, эпидемия прекратилась и уже не возобновлялась ни в Можайске, ни в его окрестностях. Избавление от эпидемии зафиксировано и в 1892 г. Во второй половине XIX в. ежегодно в мае и июне икону крестным ходом переносили в собор Гжатска. За две – три недели соборное духовенство обходило с ней дома прихожан, затем святыню переносили в городскую Богоявленскую церковь. Традиция крестных ходов сохранялась некоторое время и после закрытия обители в 1920 гг., когда монастырский Успенский собор был обращён в приходский храм. В 1912 г., ко дню празднования 100-летия Бородинской битвы, из Смоленска была принесена крестным ходом Смоленская икона Божьей Матери, которая какое-то время находилась в Колоцком монастыре. События 1912 г. так описываются современником: настоятель Колоцкого монастыря «крестным ходом должен будет встретить святую икону в селе Дровнине и сопровождать её до самого монастыря... Смоленская икона Божией Матери будет находиться в Колочском монастыре до дня отправления её на Бородинское поле, отстоящее на 12 вёрст от монастыря». Возвращение образа в Смоленск состоялось 2 сентября 1912 г. Спустя год отмечалось 500-летие обители, в которую 9 июля 1913 г. прибыл правящий епископ Смоленский и Дорогобужский Феодосий (Феодосиев). В честь праздника явления Колочской иконы около монастыря проходила ежегодная ярмарка; совершался крестный ход к источнику, который, согласно преданию, забил на том месте, где произошло явление чудотворного образа. От монастырского архива сохранились всего десяток документов 1667–1686 гг. – «Грамоты Коллегии экономии» (в составе коллекции Российского государственного архива древних актов). В 1887 г. настоятель Колоцкого монастыря сообщил графу Сергею Дмитриевичу Шереметеву, что основная часть документов утрачена в 1812 г. Остальные монастырские бумаги, до начала XX в., утрачены в период оккупации Смоленска, в 1941–1942 гг.