Полученный опыт правления и социальные связи с местной военно-служилой знатью и духовенством могли помочь Мстиславу Владимировичу в предстоящем княжении в Киеве без опоры на помощь старших родственников (прежде всего, Владимиро-Волынского князя Ярослава Святополчича). Мстислав Владимирович фактически стал соправителем стареющего отца в Киеве. Вскоре князь Владимир Мономах пожаловал Мстиславу Владимировичу и его младшему брату Ярополку Владимировичу княжение в Переяславле Русском (Южном). Таким образом, под властью Мономашичей оказалось всё население Среднего Поднепровья, за исключением жителей Черниговской земли, правители которой, ранее пожалованные Курским Посемьем, ещё не представляли для них реальной политической угрозы. Согласно гипотезе А.В. Назаренко, Владимиром Мономахом была задумана династическая реформа, в которой ключевая роль отводилась именно Мстиславу Владимировичу: он должен был в союзе с бездетным братом Ярополком Владимировичем обеспечить закрепление Киева за своими старшими сыновьями в обход младших братьев – Вячеслава Владимировича, Юрия (Георгия) Владимировича Долгорукого и Андрея Владимировича. После смерти Владимира Мономаха 19 мая 1125 г. Мстислав Владимирович занял Киевский престол и получил признание своего нового статуса от всех русских князей. Политическую и экономическую мощь Мстиславу Владимировичу и его сыновьям придавало то обстоятельство, что основная часть торгового пути «из варяг в греки» находилась под их непосредственным контролем, включая княжеские столы в Новгороде, Смоленске, Киеве и Переяславле Русском. В 1127 г. Мстислав Владимирович вмешался в конфликт между бывшим Черниговским князем Ярославом Святославичем и его племянником Тмутараканским князем Всеволодом (Кириллом) Ольговичем. Под давлением мачехи и части духовенства Мстислав Владимирович, нарушив данное полочанам крестоцелование, поддержал насильственную смену власти в Чернигове в пользу Всеволода, выдав за него свою дочь княжну Марию. Летом 1127 г. Мстислав Владимирович организовал масштабный поход против правителей Полоцкой земли, детей и внуков князя Всеслава Брячиславича, подвергшихся опале за отказ участвовать в общерусских действиях князей. При этом князь Давид Всеславич был смещён, на его место посажен Рогволод (Борис) Всеславич, который, однако, вскоре умер. В 1129 г. под предлогом нарушения полочанами крестного целования некоторые местные князья были арестованы и сосланы в почётную ссылку в Византию (двое из них вернулись на Русь лишь в 1139/1140 г.), а на полоцкий стол был посажен сын Мстислава Владимировича Изяслав. Таким образом правитель Киева подчеркнул своё старейшинство и сеньориальные права на всю Русскую землю. Мстислав Владимирович организовал успешные походы на языческие окраины Древнерусского государства – на чудь (1130 г.; на территории современной Эстонии) и на усиливавшуюся Литву (1131 г.). По мнению Валентина Лаврентьевича Янина, в 1125 г. или немного позже Мстиславу Владимировичу удалось отменить ограниченное новгородцами имущественное положение Рюриковичей в Новгородской земле.