13 мая 1932 г. епископом Каменским, викарием Донской и Новочеркасской епархии, был назначен Симеон (Михайлов), в июне того же года переведённый правящим архиереем Сарапульской епархии. Его преемником на Каменском викариатстве стал 11 августа 1932 г. Владимир (Горьковский) с правом управления Донской и Новочеркасской епархией. Однако уже 23 октября того же года управляющим Донской епархией с титулом «епископ Каменск-Шахтинский» был поставлен Александр (Раевский). После его перевода 16 февраля 1933 г. управляющим Бакинской епархией временно управляющим Донской и Новочеркасской епархией стал викарий Ростовской епархии Таганрогский епископ Иосиф (Чернов). Епископ Иосиф был арестован в январе 1935 г., и с того времени Донская и Новочеркасская епархия больше не имела ни правящих, ни викарных архиереев. В 1935 г. епископ Антоний (Романовский) был назначен на Ставропольскую кафедру с титулом «Ставропольский, Донской и Сталинградский». В 1940 гг. основная территория Донской и Новочеркасской епархии вошла в Ростовскую-на-Дону епархию и в Сталинградскую епархию. Наиболее почитаемой святыней Донской епархии являлась Аксайская икона Божьей Матери. В старочеркасском Воскресенском соборе хранились иконы, присланные в 1671 г. царём Алексеем Михайловичем: Воскресения, Благовещения Пресвятой Богородице и Богоявления. В храме также находился список с иконы Иоанна Предтечи, в 1711 г. перед сдачей города туркам перенесённый из Азова в донецкий во имя Иоанна Предтечи мужской монастырь. В Александро-Невской церкви Новочеркасска почиталась Иерусалимская иконы Божьей Матери, которой в 1833 г. благословил войско Донское Иерусалимский патриарх Афанасий V (1827–1844 гг.). Монастыри: Усть-Медведицкий в честь Преображения Господня, или Межигорская Спасова пустынь (город Серафимович, основан в 1665 г. как мужской, в 1754 г. перенесён на новое место, в 1785 г. преобразован в женский, в 1788 г. упразднён, восстановлен в 1798 г., закрыт в 1927 г., восстановлен в 1991 г. как мужской в составе Волгоградской епархии, в 2001 г. преобразован в женский); Мигулинский во имя Святой Троицы (мужской, близ станицы Мигулинской (современная Волгоградская область), основан в 1690 или в 1700 г., упразднён в 1788 г.); кременский в честь Вознесения Господня (мужской, основан в 1693 г., упразднён в 1788 г., восстановлен в 1798 г., имел приписной Пятницкий скит, закрыт в начале 1920 гг., возрождён в 1991 г. в составе Волгоградской епархии); старочеркасский Ефремовский (в станице Старочеркасской, основан в 1837 г. как женский, закрыт в начале 1920 гг., возрождён в 1994 г. как мужской в составе Ростовской епархии); Бекреневский во имя Николая Чудотворца (близ станицы Мариинской, основан в 1892 г. как мужской, упразднён в 1910 г., в следующем году восстановлен сначала как подворье Старочеркасского женского монастыря, затем как самостоятельный женский монастырь, окончательно закрыт в 1928 г.).