В связи с началом Первой мировой войны в епархии усилилась патриотическая агитация, проводились детские религиозно-нравственные собрания, создавались церковные общества милосердия и взаимопомощи. 26 апреля 1917 г. состоялся епархиальный съезд, в котором приняли участие 318 представителей духовенства и мирян. На съезде были подтверждены полномочия по управлению Донской и Новочеркасской епархией архиепископа Митрофана и викарного Аксайского епископа Ермогена. Съезд приветствовал свержение самодержавия, призвал паству Донской епархии к продолжению войны до победного конца и к послушанию Временному правительству. Такие же заявления были приняты и на окружных съездах духовенства епархии весной-летом 1917 г. Архиепископ Митрофан возглавил делегацию епархии на поместном Соборе Российской православной церкви 1917–1918 гг.; как один из наиболее авторитетных иерархов, он был избран председателем отдела личного состава Собора. Летом 1917 г. состоялись первые выборы Донского казачьего атамана, которым стал генерал Алексей Максимович Каледин, в новочеркасском Вознесенском войсковом соборе был отслужен молебен, новый атаман получил церковное благословение на труды во благо казачества. После революции 1917 г. область Войска Донского стала одним из центров сопротивления большевикам: из Москвы, Петрограда и других мест в Новочеркасск прибывали не смирившиеся с новой властью политические деятели, военные, интеллигенция. В конце 1917 г. генералы Михаил Васильевич Алексеев, Лавр Георгиевич Корнилов, А.М. Каледин предприняли попытку образовать Всероссийское правительство и приступили к формированию Добровольческой Армии. С ноября 1917 г. по февраль 1918 г. они контролировали область Войска Донского. Однако казаки-фронтовики под влиянием большевистской пропаганды не признали правительство А.М. Каледина, на съезде фронтового казачества в станице Каменской в январе 1918 г. был образован Донской казачий временный революционный комитет (ВРК), объявивший войсковое правительство низложенным. 11 февраля (29 января) на заседании войскового правительства А.М. Каледин сложил полномочия и в тот же день покончил с собой. Вскоре в войсковом соборе был отслужен молебен по случаю избрания атаманом Анатолия Михайловича Назарова. 25(12) февраля 1918 г. Красная Армия заняла Новочеркасск. 23 марта декретом Донского казачьего ВРК в границах области Войска Донского была образована Донская советская республика с центром в Ростове-на-Дону. Власть большевиков была непрочной, весь край был охвачен антибольшевистскими восстаниями, территория которых, несмотря на попытки подавления отрядами Семёна Михайловича Буденного, Климента Ефремовича Ворошилова и др., постоянно расширялась. В марте в область Войска Донского вошли немецкие войска, 1 мая они заняли Таганрог, 8 мая – Ростов-на-Дону. 16 апреля власть в республике перешла к Чрезвычайному штабу обороны во главе с Григорием Константиновичем Орджоникидзе, в мае советское руководство переехало в Царицын, 30 сентября 1918 г. декретом ВЦИК Донская советская республика была упразднена.