На лексико-семантическом уровне справа заключалась в последовательном устранении латинизмов, попавших в Геннадиевскую Библию вместе с переводами из Вульгаты. «Острожскую Библию» исследователи признают образцом полиграфического мастерства, не имеющим аналогов в кириллическом книгопечатании своего времени. По объёму она вдвое превышает все остальные издания Ивана Фёдорова, вместе взятые. «Острожская Библия» содержит 628 листов ин-фолио, сброшюрованных в 104 тетради. Первые восемь листов не нумерованы, после идут пять фолиаций: 276, 180, 30, 56, 78 листов. Наличие ненумерованных листов и нескольких фолиаций обусловлено тем, что отдельные разделы печатались не в той последовательности, в которой они размещены в книге. Текст на полных страницах набран в два столбца по 50 строк. В «Острожской Библии» использованы шесть шрифтов: четыре кириллических и два греческих, которые были разработаны Иваном Фёдоровым для этого издания. Основным был мелкий кириллический полуустав с курсивными элементами. Печать двумя красками: чёрной (основной) и красной. Художественное оформление «Острожской Библии» включает ксилографическую титульную рамку, изображение герба князя К.К. Острожского, типографский знак Ивана Фёдорова, 81 ксилографическую заставку (с 16 досок), 68 концовок (с 19 досок), 35 мелких орнаментальных украшений в 20 комбинациях, набранных с шестью отливных узоров, киноварные заголовки вязью (всего 78 строк), 1384 инициала (со 113 форм). Отдельные ксилографии «Острожской Библии» представлены в ранних изданиях Ивана Фёдорова. При оформлении титульного листа использована рамка фронтисписа московского 1564 г. и львовского 1574 г. изданий «Апостола»; типографский знак Ивана Фёдорова раньше был воспроизведён в Новом Завете с «Псалтирью» 1580 г.; заставка перед началом книги «Бытие» оттиснута в переработанном виде с одной из досок московского «Апостола». Однако большинство орнаментально-графических ксилографий «Острожской Библии» было выполнено специально для неё. Исследователи отмечают близость стиля заставок и инициалов «Острожской Библии» к венецианской книжной графике эпохи Ренессанса. Изначально Иван Фёдоров планировал иллюстрировать «Острожскую Библию» по образцу западноевропейских библейских изданий сюжетными гравюрами. С этой целью был заключён договор с вроцлавским гравёром Блазиусом Эбишем об изготовлении 150 гравюр из меди, но этот проект не был реализован. В экземплярах «Острожской Библии» есть различия как в оформлении, так и в тексте. Это обусловлено тем, что в ходе печатания в набор вносили изменения и исправления, при этом вариантные листы при комплектовании экземпляров подбирали в различных комбинациях, которых насчитывается 29, из них семь комбинаций встречаются в значительном количестве экземпляров. «Острожская Библия» была издана большим по тому времени тиражом, размер которого реконструируется в диапазоне от 1200 до 1500 экз. (влитературе описано около 450 экз. «Острожской Библии»).