На раде в 1621 г. казаки предлагали, чтобы Киев и крепости на левобережье Днепра перешли под власть царя. Данную позицию разделяли часть мелкой православной шляхты и киевские мещане. Политическая позиция реестрового казачества и запорожцев особенно укрепилась в 1621 г., после их удачного участия в Хотинской войне против Османской империи. Представители митрополита Иова (Борецкого) в 1624–1625 гг. поднимали в Москве вопрос о переходе Украины под власть царя. Весной 1630 г., во время восстания Тараса Федоровича, которое охватило оба берега Днепра, запорожцы впервые открыто сформулировали лозунг защиты православной веры. Восстание стало реакцией на невыгодные условия Куруковского договора 1625 г. между казаками и польскимир властями, в соответствии с которым большинство рядового казачества, в первую очередь, запорожцы, должно было вернуться в крепостное состояние. Одной из причин поражения восстания 1630 г. стали трения между казаками: запорожцы обвинили старшину реестровых казаков в сотрудничестве с поляками и переходе в католицизм (такие же обвинения звучали во время антипольского восстания в 1637–1638 гг.). На общей казачьей раде в Корсуне в 1632 г. пришедшие к власти рядовые реестровые казаки вновь предлагали захватить Киев и перейти на сторону России. Учитывая настроения реестрового казачества, запорожцев и православного населения Речи Посполитой, король Владислав IV Ваза пошёл на уступки. На сейме в 1632 г. он добивался возвращения части прав и привилегий украинской шляхте, обещал признать православную иерархию, вернуть имущество, захваченное у православных униатами. Вместе с тем король удалил из Киева митрополита Исаию (Копинского) и заменил его более лояльным к польской власти митрополитом Петром (Могилой). В мае 1637 г. запорожцы вместе с реестровыми казаками под руководством Павлюка (П.М. Бута) захватили реестровую артиллерию в Черкассах, в августе–октябре 1637 г. распространили свою власть от Киева и Нежина до Запорожской Сечи. В феврале 1638 г. Павлюк был казнён. В мае 1638 г. восставшие под руководством гетмана Якова Острянина разгромили реестровых казаков под Голтвой и коронные войска под Лубнами. После поражения восстания Яков Острянин вместе с запорожцами ушёл на службу в Россию, на Дон. Многие из казаков, оставшихся для переговоров с поляками, были убиты. Карательные меры против казаков были утверждены на сейме; в частности, была принята «Ординация войска Запорожского реестрового», ограничивавшая права реестровых казаков: «Ординацией...» упразднялась должность гетмана, отменялась выборность есаулов и полковников. В августе 1638 г. Запорожская Сечь на Базавлуке была разрушена войском польного гетмана Миколая Потоцкого (по прозванию Медвежья Лапа). Запорожская Сечь на Микитином Роге находилась в неудобном месте и была легкодоступной со степной стороны, что стало причиной поражения запорожцев здесь в 1638 г. Хотя с этого времени польские власти получили контроль над Запорожской Сечью, с Микитина Рога в 1648 г. началось восстание под предводительством гетмана Богдана Михайловича Хмельницкого, когда гетман и казачья старшина объявили о разрыве отношений с Речью Посполитой и о переходе под власть царя Алексея Михайловича. Непосредственными причинами выступления стали навязанная казачеству в 1638 г. «Ординация...», крайняя степень недовольства православного населения Украины внутренней политикой магнатов-католиков и смерть популярного среди реестровых казаков и запорожцев короля Владислава IV Вазы.