В рукописи XVIII в., принадлежавшей Георгию Дмитриевичу Филимонову, сказано: «Подобием рус, власы велики, брада аки Никиты мученика подоле, риза на нём едина раздранная серодикая, правое плечо наго, руки крестообразно, ноги голы». Согласно подлиннику 1850 г., составленному диаконом Василием Поникаровским с образца 1658 г., Исидор Твердислов «бе рус, власы и брада коротки, правое плечо голое, риза едина с леваго плеча под правое зелена, в руках две кочерги» (Архив музея-заповедника «Ростовский кремль»). В пособии для иконописцев Виктора Доримедонтовича Фартусова 1910 г. блаженный описан так: «Типа немецкаго с запада; преклонных лет, волосы длинны, русы, борода не велика, с малою проседью; в одной убогой рубахе, босой. Можно давать ему хартию с его изречением: “Многими скорбьми подобает ти внити в Царство Небесное, нужно бо есть, и нуждницы восхищают е”». Исидор Твердислов изображался преимущественно на иконах с избранными Ростовскими святыми. На одной из ранних, трёхрядной иконе «Воздвижение Креста. Покров Богородицы. Избранные святые» работы Д.И. Усова (1565 г., Третьяковская галерея), он представлен в традиционной иконографии, стоящим в верхнем ряду чудотворцев крайним справа, рядом с Авраамием и Ростовскими святителями. На правом поле иконы «Ростовские чудотворцы и преподобный Сергий Радонежский» середины XVI в. из церкви Богоявления села Уславцево Ростовского уезда (музей-заповедник «Ростовский кремль») Исидор Твердислов написан в рост, в молении, вполоборота влево, босой и полуобнажённый, на правом плече зелёная риза, короткие русые волосы взлохмачены, борода едва заметна. Во вкладных книгах Борисоглебского на Устье монастыря указано, что в местном ряду одного из храмов находилась икона с образами Леонтия Ростовского и Исидора Твердислова: в конце XVI в. старец Авраамий дал 51 руб. «да обложил серебром и позолотил две иконы местные Леонтия да Сидора Ростовских чудотворцев да икону Николая чудотворца з деянием». К редким единоличным изображениям исследователи относят икону «Блаженный Исидор Ростовский, предстоящий Богоматери с Младенцем» первой половины XVII в. (Сольвычегодский музей). Судя по размерам (141,5х44,7 см), образ предназначался для храма; по мнению исследователей, именно он упоминается в описях XVII в. Благовещенского собора в Сольвычегодске. Исидор Твердислов написан в молитвенном обращении к образу Божьей Матери с Младенцем, изображённому в сегменте неба в левом верхнем углу средника. Святой представлен в рост, в повороте влево, в оливковой одежде чуть ниже колен, пальцы поднятой правой руки сложены в двуперстном жесте. У него короткие густые волосы и небольшая русая борода, надпись: «ОАГИ(с) ПРАВЕ(д)НЫ ИСИДО(р) РОСТО(в)». На иконе «Избранные святые» второй половины XVII в. из церкви села Демьяны Ростовского района Ярославской области (Сергиево-Посадский музей-заповедник) во втором ряду вторым слева изображён Исидор Твердислов: короткие борода и волосы, зеленоватая риза переброшена через левое плечо, руки крестообразно сложены на груди. На иконе «Спас Нерукотворный, с предстоящими святыми» (1645 г., музей-заповедник «Ростовский кремль»), до 1743 г. находившейся над городскими въездными воротами, в середине XVIII в. были приписаны Ростовские чудотворцы, в том числе Исидор Твердислов как средовек, в верхнем ряду второй справа. Композиция иконы-пядницы «Избранные святые, с образом Спаса Нерукотворного на поле» середины – второй половины XVII в. (частное собрание) состоит из шести рядов с полуфигурами чудотворцев, среди которых много Московских, Угличских и Ростовских (Исидор Твердислов во втором ряду второй справа).