Чистая душа юного подвижника, как губка, впитывала в себя поучения духовного отца и назидалась примером его святой жизни. Видя ревность и усердие юного Даниила, Пафнутий совершил над ним монашеский постриг и нарёк Давидом в честь преподобного Давида Солунского. После преставления Пафнутия Давид нашёл духовное руководство в лице Иосифа Волоцкого. После его переселения в Волоколамскую землю для устроения там своего монастыря духовная связь между ним и Давидом не прерывалась до самой кончины святого Волоцкой земли. Давид более сорока лет подвизался в Боровской обители, некоторое время пребывал в безмолвном уединении, где у него созрела мысль основать свой пустынный монастырь. В 1515 г. он оставил эту обитель и пришёл в пустынную местность, принадлежавшую князю Василию Семёновичу Стародубскому, на правом берегу реки Лопасни в древней Хутынской волости, которая располагалась в 23 верстах от Серпухова и 80 верстах от Москвы. Святой пришёл сюда с иконой Знамения Богоматери, с двумя монахами и двумя послушниками. 31 мая 1515 г. Давид положил начало пустыни, носящей его имя. Поселившись здесь, он поставил кельи, возвёл первые деревянные храмы в честь Вознесения и Спаса Иисуса Христа с приделами в честь Успения Пресвятой Богородицы и святителя Николая. Иосиф Волоцкий незадолго до своей кончины посетил эту новую обитель, трапезовал с Давидом и братией и наставлял их в слове Божьем. Более полстолетия подвизался Давид в монашестве, принося усердные моления о мире всего мира, был духовным отцом и наставником всего окрестного населения, а также и его кормильцем. Много потрудился он при строительстве монастыря. Его собственными руками была посажена густая липовая роща возле обители. Братия никогда не видела его праздным. 19 сентября 1529 г. он предал Богу свою праведную душу. Честное тело его было погребено в основанной им пустыни, в церкви Знамения Богоматери, сооружённой в его память, т.к. икона Знамения Пресвятой Богородицы была келейным моленным образом Давида. Почитание преподобного началось сразу же после его кончины. Уже в синодике 1602 г. он именуется преподобным, а в документах 1657 г. ещё и чудотворцем. Записей о чудесных явлениях милости Божьей по молитвам преподобного не сохранилось, но о том, что эти явления были, свидетельствуют рассказы жителей окрестных селений. Имя преподобного Давида было окружено большим почитанием; к его гробу во множестве стекались паломники. Возрождение обители началось в 1995 г., после лихолетья большевистской смуты, когда монастырь был разграблен и почти уничтожен. Мощи преподобного Давида Серпуховского были торжественно обретены в обители 24 мая / 6 июня 1997 г. 27 января 2001 г. имя преподобного Давида было включено в Собор Московских святых.